学术论文

      口蹄疫病毒2B基因绿色荧光蛋白融合表达质粒的构建及表达

      Construction of Recombinant Plasmid for Fusion Expression of Foot and Mouth Disease Virus 2B Gene and Green Fluorescent Protein Gene

      摘要:
      目的 构建口蹄疫病毒(FMDV)2B基因绿色荧光蛋白(GFP)融合表达质粒,并在BHK-21细胞中表达.方法 RT-PCR扩增O型口蹄疫病毒WFL株的2B基因,克隆入表达载体pEGFP-C1,并进行双酶切、PCR及测序鉴定.将阳性重组质粒转染BHK-21细胞,检测绿色荧光蛋白的表达和2B基因转录水平.结果 经双酶切及PCR鉴定,目的 基因片段大小与预期相符,测序结果与WFL株相应序列一致.荧光显微镜和流式细胞仪均检测到细胞内绿色荧光蛋白的表达,荧光定量PCR检测到细胞内有2B基因的转录.结论 已成功构建了FMDV 2B基因GFP融合表达质粒,并在BHK一21细胞中获得了表达.
      作者: 崔丽瑾 [1] 王兴龙 [2] 梅英武 [3] 任林柱 [3] 闰广谋 [3] 张辉 [1] 郎需龙 [2] 段小宇 [1] 路浩 [1]
      作者单位: 吉林大学畜牧兽医学院,长春,130062;军事医学科学院军事兽医研究所,长春,130062 军事医学科学院军事兽医研究所,长春,130062 吉林大学畜牧兽医学院,长春,130062
      刊 名: 中国生物制品学杂志 ISTIC
      年,卷(期): 2008, 21(9)
      分类号: Q786
      机标分类号: S85 TQ4
      在线出版日期: 2008年11月18日
      基金项目: 军事医学科学院基金,吉林省科技厅科技发展计划