学术论文

      幽门螺杆菌尿素酶B亚单位基因的克隆及其高效表达

      Cloning and High Expression of Helicobacter pylori Urease B Subunit Gene

      摘要:
      目的 克隆幽门螺杆菌尿素酶B亚单位(UreB)基因,构建原核表达载体,并进行高效表达.方法 以幽门螺杆菌基因组DNA为模板,PCR扩增UreB基因,双酶切后,与质粒pET-22b(+)连接,构建表达载体pET-22b(+)/UreB,分别转化E. coli BL21(DE3)、Origami(DE3)和Rossetta(DE3),经IPTG诱导后,进行SDS-PAGE和Western blot分析.结果 经酶切及测序,证明幽门螺杆菌UreB基因的原核表达载体构建正确.3种重组菌的诱导表达产物经SDS-PAGE分析,均可见相对分子质量为64000的目的 蛋白条带,Rossetta(DE3)重组菌目的 蛋白表达量最高,约占菌体蛋白的35%.Western blot结果表明,表达的目的 蛋白具有良好的反应原性.结论 已成功克隆了幽门螺杆菌UreB基因,并在大肠杆菌Rosssetta(DE3)中获得了高效表达.
      作者: 朱卫华 [1] 李生迪 [1] 宣俊文 [1] 陈翠萍 [2]
      作者单位: 兰州生物制品研究所第一研究室,兰州,730046 中国药品生物制品检定所诊断室,北京,100050
      刊 名: 中国生物制品学杂志 ISTIC
      年,卷(期): 2008, 21(9)
      分类号: R378 Q785 Q786
      机标分类号: TQ9 R39
      在线出版日期: 2008年11月18日