学术论文

      抗戊型肝炎病毒IgG抗体定量线性标准品的标定及初步应用

      Calibration and Preliminary Application of Linear Quantitation Standard for Anti-HEV IgG Antibody

      摘要:
      目的 建立抗戊型肝炎病毒(Anti-HEV)IgG抗体的定量线性标准品,并进行初步应用.方法 利用抗-HEV IgG和抗-HEV IgM ELISA检测试剂筛选出1份抗-HEV IgG阳性血清L9,经基因1型和4型的HEV ORF2 C-端抗原及239抗原进行Western blot确认后,用WHO定量标准品,由3个实验室协作标定,利用量反应平行线法计算其抗-HEV IgG的含量.考察已标定的L9血清的稳定性,并用所标定的1.5倍系列稀释的血清对国内外6家抗-HEV IgG试剂的灵敏度进行检测.选择一灵敏度较高的试剂,在其线性范围内取L9的5个稀释度作为抗-HEV IgG抗体定量线性标准,对高、中、低浓度的3份临床血清重复检测5次,考察其重复性;对实验感染猴的系列血清中抗-HEV IgG含量进行定量检测,考核该定量线性标准品的应用效果;并对每次定量试验中的线性方程进行分析,确定相关系数r值和斜率k值的范围.结果 经国内外试剂检测筛选出的阳性血清L9与基因1型和4型的HEV ORF2 C-端抗原及239抗原均有阳性反应.经协作标定,L9血清抗-HEV IgG含量为16.9 U/ml.L9血清在-20℃下保存6、12、18个月,2~8℃保存24、48、96 h后,定量结果均在95%置信区间内,且抗-HEV IgG含量均未明显下降.6家抗-HEV IgG检测试剂灵敏度差异较大,范围为0.03~5.00 U/ml.确定L9血清从0.42 U/ml开始的5个1.5倍系列稀释度,作为某一试剂抗-HEV IgG抗体定量线性标准品.利用该线性定量标准检测高、中、低浓度的3份临床血清,定量结果重复性较好;对实验感染猴系列血清进行定量检测,结果可有效地反映抗体水平变化趋势;94%的定量检测试验,r≥0.98,1.15≥k≥0.95.结论 已建立了抗-HEV IgG抗体定量线性标准品,可用于疫苗免疫原性评价和流行病学调查.
      作者: 黄维金 [1] 吴星 [1] 周诚 [1] 何鹏 [1] 葛胜祥 [2] 乔杉 [3] 张华远 [1] 蓝海云 [1] 辜文洁 [1] 梁争论 [1] 祁自柏 [1] 李河民 [1]
      作者单位: 中国药品生物制品检定所,北京,100050 厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室,厦门,361005 万泰生物药业有限公司,北京,518020
      刊 名: 中国生物制品学杂志 ISTIC
      年,卷(期): 2008, 21(9)
      分类号: R392-33
      机标分类号: R51 S85
      在线出版日期: 2008年11月18日