学术论文

      实时定量PCR检测乙型肝炎病毒拉米夫定耐药突变及其与临床指标的相关性

      Determination of Lamivudine-resistant Mutation of Hepatitis B Virus by Real-time Quantitative PCR and Analysis of Relationship between Mutation and Clinical Indexes

      摘要:
      目的 采用实时定量PCR检测接受与未接受拉米夫定治疗的乙肝患者血清中乙肝病毒(HBV)突变情况,并将检测结果与临床指标进行相关性分析.方法 采用touch-down PCR反应程序,并结合SYBR Green I染料进行实时定量PCR,检测115份乙肝患者血清标本(其中50名患者未服用过拉米夫定,65名患者服用过拉米夫定).随机选择115份标本中的30份用同样的方法提取血清DNA,进行PCR扩增及测序,并与实时定量PCR检测结果进行比较.将乙肝病毒YMDD突变实时定量PCR检测结果与临床各指标之间进行相关性分析.结果 115份血清标本中,75份含有野生型HBV(其中49份来自未接受过拉米夫定治疗的患者),40份含有YMDD突变的HBV(其中1份来自未接受过拉米夫定治疗的患者);180位点的突变检测中,98份标本含有野生型HBV,17份标本含有突变型HBV.随机选取的30份标本测序结果与实时定量PCR检测结果完全一致.乙肝病毒拉米夫定耐药突变与患者的性别、血清DNA水平、病毒基因型之间无相关性,而乙肝病毒YMDD变异与患者服用拉米夫定的时间长短有相关性,用药时间越长,发生突变的几率越大.乙肝患者服用拉米夫定后,180和204位点突变具有相关性.结论 实时定量PCR可以高效、准确地检测拉米夫定治疗后乙肝病毒的耐药突变.
      作者: 卜范峰 [1] 鲁艳芹 [1] 韩金祥 [1] 冯照雷 [2] 王丽娜 [2] 沈忠林 [3]
      作者单位: 山东省医药生物技术研究中心,卫生部生物技术药物重点实验室,济南,250062 济南市传染病医院中心实验室,济南,250021 山东省兖矿集团总医院检验科,邹城,273500
      刊 名: 中国生物制品学杂志 ISTIC
      年,卷(期): 2008, 21(9)
      分类号: R512.6+2 R311
      机标分类号: R44 R97
      在线出版日期: 2008年11月18日