学术论文

      HIV-1中和抗体检测方法的建立

      Development of A Method for Determination of HIV-1 Neutralizing Antibody

      摘要:
      目的 以荧光素酶作为报告基因,表达假病毒,建立快速、有效的HIV-1中和抗体检测方法.方法 将HIV-1中国流行株B/C重组亚型和C亚型Envelope基因的真核表达质粒分别与带有荧光素酶报告基因的pNL4-3.Luc.R-E质粒共转染293T细胞,培养48 h后收获含有假病毒的上清液,感染表达CD4受体和一个辅助受体CCR5的HOS细胞,培养72 h后,裂解细胞,检测荧光素酶每含量.结果 HIV-1的B/C重组亚型和C亚型Envelope基因真核表达质粒分别与pNL4-3.Lac.R-E质粒共转染的293T细胞,均有HIV-1结构蛋白Gagpol和Env的表达,相对分子质量分别为55000和160000,用产生的假病毒感染HOS-CD4-CCR5/CXCR4细胞后,产生的荧光素酶含量明显高于对照组.结论 已建立了瞬时转染检测HIV-1中和抗体的方法,为今后抗体样本及病毒样本的检测提供了参考.
      < E doi: 10.3969/j.issn.1004-5503.2008.09.025
      作者: 赵东海 [1] 张喜珍 [2] 马红霞 [2] 孔维 [2] 于湘晖 [2]
      作者单位: 吉林大学生命科学学院,吉林大学疫苗研究中心,长春,130021;吉林医药学院病理学教研室,吉林,132013 吉林大学生命科学学院,吉林大学疫苗研究中心,长春,130021
      刊 名: 中国生物制品学杂志 ISTIC
      Journal: CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
      年,卷(期): 2008, 21(9)
      分类号: R373.9 R392-33
      关键词: 人免疫缺陷病毒1型知识脉络中和抗体知识脉络荧光素酶知识脉络假病毒知识脉络
      机标分类号: R3 R51
      在线出版日期: 2008年11月18日
      基金项目: 国家自然科学基金