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岡田酸所致微管相關蛋白tau Ser396位點過度磷酸化抑制細胞凋亡

Inhibition of Apoptosis by Hyperphosphorylation of Microtubule-associated Protein Tau at Set396 Site Induced by Okadaic Acid

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doi:
10.3870/j.issn.1672-0741.2009.03.001
摘要:
目的 探討磷酸酯酶活性降低致tau過度磷酸化與細胞凋亡的關系.方法 穩定表達人tau eDNA的鼠成神經瘤細胞(N2a/tau)分3組.對照組不處理;十字孢堿(staurosporine,STP,凋亡誘導劑)處理6 h為STP組;用磷酸酯酶PP-2A的抑制劑岡田酸(okadaic acid,OA)處理4 h,再用STP處理6 h為OA+STP組.流式細胞儀檢測凋亡率,免疫印跡檢測Ser396位點磷酸化tau(Ser396 p-tau)和總tau的表達,免疫熒光雙標檢測Ser396 p-tau的陽性產物與活化的半胱氨酸蛋白酶(Cleaved Caspase-3)陽性產物的共定位關系.結果 ①凋亡率:對照組為(4.37±1.47)%,STP組為(19.84±3.25)%,OA+STP組為(12.12±2.46)%;②免疫印跡:OA+STP組Ser396 p-tau的表達明顯高于另兩組,總tau表達組間無差異;③免疫熒光雙標:進一步印證免疫印跡結果,且3組均顯示活化的Caspase-3和Ser396 p-tau陽性產物大多不共定位于相同細胞.結論 PP-2A活性降低所致tau Ser396位點的過度磷酸化可抑制細胞凋亡,結合前期的實驗進一步明確特殊位點過度磷酸化的tau可抑制細胞進入快速的凋亡程序.
作者 沈建英徐桂香左斌甘輝肖娟娟張敏海汪薇曦李宏蓮
Author:
作者單位 華中科技大學同濟醫學院基礎醫學院解剖學系組織胚胎學教研室,武漢,430030
期 刊: 華中科技大學學報(醫學版)   ISTICPKU
Journal: ACTA MEDICINAE UNIVERSITATIS SCIENCE OF TECHNOLOGIAE HUAZHONG
年,卷(期) 2009, 38(3)
分類號 R749.1
關鍵詞: 阿爾茨海默病 知識脈絡    tau蛋白 知識脈絡    磷酸酯酶PP-2A 知識脈絡    細胞凋亡 知識脈絡   
機標分類號 R74 R97
機標關鍵詞 岡田酸    微管相關蛋白    tau過度磷酸化    位點    抑制細胞凋亡    Okadaic Acid    免疫熒光雙標    免疫印跡檢測    STP    Caspase-3    磷酸酯酶    活性降低    處理    穩定表達    鼠成神經瘤細胞    流式細胞儀檢測    半胱氨酸蛋白酶    staurosporine    陽性    共定位
基金項目 國家自然科學基金,教育部博士點基金新教師基金
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