實時熒光定量PCR法檢測轉基因小鼠拷貝數

Absolute Quantitative Real-Time PCR Assay for Determining Transgene Copy Number in Transgenic Mice

doi：

摘要：

目的 利用實時熒光定量PCR法鑒定轉基因小鼠外源基因插入拷貝數.方法 以TG-CARK轉基因首見鼠為研究對象,選取小鼠的高度保守基因Fabpi為內參,利用絕對定量的實時熒光PCR法鑒定轉基因小鼠拷貝數,并與傳統的Southern blot方法的定量結果進行比較.結果 實時定量PCR鑒定的轉基因拷貝數與Southern blot法完全一致,三只TG-CARK首見小鼠的拷貝數分別為1,7,45.結論 實時定量 PCR 技術具有高準確性、高穩定性、高通量和低成本的優點,是比傳統雜交技術更好的鑒定小鼠轉基因拷貝數的方法.

作者：	王曉建[1]楊旭[1]宋曉東[1]張禪那[1]劉繼斌[1]邸冉[2]張連峰[2]惠汝太[1]
Author：	WANG Xiao-jian[1]  YANG Xu[1]  SONG Xiao-dong[1]  ZHANG Chan-na[1]  LIU Ji-bin[1]  DI Ran[2]  ZHANG Lian-feng[2]  HUI Ru-tai[1]
作者單位：	中國醫學科學院,阜外心血管病醫院,心血管病相關基因與臨床研究教育部重點實驗室(中德實驗室),北京,100037 中國醫學科學院實驗動物研究所,分子遺傳中心,北京,100021
期 刊：	中國實驗動物學報   ISTIC
Journal：	ACTA LABORATORIUM ANIMALIS SCIENTIA SINICA
年，卷(期)：	2007, 15(3)
分類號：	R-331
關鍵詞：	轉基因    拷貝數    實時定量PCR
機標分類號：	R58 Q78
機標關鍵詞：	實時熒光定量    檢測    轉基因小鼠    基因拷貝數    實時定量    鑒定    方法    雜交技術    研究對象    絕對定量    基因插入    高穩定性    定量結果    準確性    高通量    選取    外源    內參    成本
基金項目：	北京市自然科學基金