中國白兔白介素-10基因的克隆、表達及其抗體的制備

Expression and Cloning of IL-10 Gene in Chinese White Rabbits and Preparation of Antibodies against Recombinant IL-10

doi：

摘要：

目的 克隆并表達中國白兔IL-10基因,制備抗IL-10多克隆抗體.方法 運用RT-PCR對從ConA誘導后的中國白兔外周血單核細胞(PMBCr)總RNA中擴增IL-10基因,克隆后進行測序和遺傳進化分析,同時將其亞克隆pET28a中,在大腸桿菌中誘導表達,并用純化的表達產物制備多克隆抗體.結果 該基因全長537 bp,編碼178個氨基酸.與歐洲兔IL-10基因同源性很高,但與鼠、雞、河豚和斑馬魚等不同物種IL-10基因差異較大.經IPTG誘導后,重組菌體裂解物經SDS-PAGE電泳可檢測到相對分子質量為23.4 ×103的重組蛋白.Western blot分析表明,中國白兔IL-10基因已經表達.重組表達的蛋白量可占菌體蛋白的15.2%.結論 成功實現了中國白兔IL-10的原核表達,制備了小鼠抗兔IL-10的多克隆抗體.

作者：	孟慶玲[1]才學鵬[2]喬軍[2]景志忠[2]張艷[3]田廣孚[2]郭愛疆[2]
Author：	MENG Qing-ling[1]  CAI Xue-peng[2]  QIAO Jun[2]  JING Zhi-zhong[2]  ZHANG Yan[3]  TIAN Guang-fu[2]  GUO Ai-jiang[2]
作者單位：	甘肅農業大學動物醫學院,蘭州,730070;中國農業科學院蘭州獸醫研究所,家畜疫病病原生物學國家重點實驗室,蘭州,730046 中國農業科學院蘭州獸醫研究所,家畜疫病病原生物學國家重點實驗室,蘭州,730046 甘肅農業大學動物醫學院,蘭州,730070
期 刊：	中國實驗動物學報   ISTIC
Journal：	ACTA LABORATORIUM ANIMALIS SCIENTIA SINICA
年，卷(期)：	2007, 15(3)
分類號：	R349.64
關鍵詞：	白細胞介素-10基因    表達    抗體制備
機標分類號：	R37 S85
機標關鍵詞：	中國    兔白介素    基因同源性    多克隆抗體    白兔    相對分子質量為    外周血單核細胞    重組蛋白    遺傳進化分析    重組表達    原核表達    誘導表達    菌體蛋白    基因差異    大腸桿菌    亞克隆    物制備    鼠抗兔    裂解物    可檢測
基金項目：