建立雞EPGCs單細胞克隆株初探

Establishment of Single-Cell Clonal Lines from Chicken EPGCs

doi：

摘要：

目的 探索雞EPGCs單細胞克隆建立細胞系的可能性,并對其生物學特性進行鑒定.方法 采取19期和28期的雞EPGCs,體外培養傳至第4代的細胞聚合體,用胰酶消化將細胞分散成單細胞懸液,將單個細胞接種至96孔板,每個孔內接種1個細胞,生長出的細胞集落用膠原酶消化傳代,細胞化學法和免疫熒光法檢測多向分化細胞的表面標志物;常規染色體核型檢查.結果 接種的288個單細胞中有9個擴增,其中7個傳至第2代,2個傳至第4代,克隆形成率為3.1%.擴增出的2～4代單細胞克隆能穩定增殖不分化,具有正常二倍性染色體核型、堿性磷酸酶陽性、階段特異性胚胎抗原(SSEA)-1等特征性細胞表面標志物呈陽性;離體情況下具有形成類胚體和類上皮樣細胞的能力.結論 建立雞EPGCs單細胞克隆細胞系是可行的,其生物學特性穩定.

作者：	李碧春秦潔趙文明徐琪吳信生陳國宏
Author：	LI Bi-chun  QIN Jie  ZHAO Wen-ming  XU Qi  WU Xin-sheng  CHEN Guo-hong
作者單位：	揚州大學動物科學與技術學院,揚州,225009
期 刊：	中國實驗動物學報   ISTIC
Journal：	ACTA LABORATORIUM ANIMALIS SCIENTIA SINICA
年，卷(期)：	2007, 15(4)
分類號：	R321.1
關鍵詞：	雞,胚胎    原始生殖細胞    單細胞克隆    生物學特性
機標分類號：	R31 R73
機標關鍵詞：	單細胞克隆    生物學特性    染色體核型    細胞表面標志物    階段特異性胚胎抗原    免疫熒光法檢測    細胞系    酶消化    細胞接種    上皮樣細胞    克隆形成率    堿性磷酸酶    單細胞懸液    陽性    細胞集落    體外培養    擴增    分化細胞    細胞分    類胚體
基金項目：	國家自然科學基金