仙臺病毒F基因的克隆及原核表達

Expression of Fusion Gene of Sendai Virus in Prokaryotic System

doi：

摘要：

目的 利用原核表達系統表達仙臺病毒(Sendai Virus)F蛋白主要抗原片段FP(S),并對表達產物進行免疫學初步研究.方法 根據GenBank公布的仙臺病毒F蛋白(gi:9627219)的基因序列設計特異性引物,通過RT-PCR擴增出F基因的主要抗原片段FP(S),插入pMD-18-T載體中,鑒定正確后克隆入pQE31原核表達載體中,將鑒定正確的pQE31-FP(S)轉化大腸埃希菌M15,IPTG誘導表達,對大腸埃希菌裂解物進行SDS-PAGE和Western-blot驗證.結果 大腸埃希菌表達的FP(S)相對分子質量約26×103,與預期相符;能與SeV陽性血清發生特異性反應,出現單一條帶.結論 原核表達的FP(S)蛋白有良好的抗原性,為檢測仙臺病毒抗體的ELISA檢測方法的研究奠定了基礎.

作者：	王宗耀[1]王勝昌[2]胡建華[2]高誠[2]
Author：	WANG Zong-yao[1]  WANG Sheng-chang[2]  HU Jian-hua[2]  GAO Cheng[2]
作者單位：	揚州大學比較醫學中心,揚州,225009;上海市實驗動物質量監督檢驗站,上海,200032;上海實驗動物研究中心,上海市計劃生育科學研究所,上海,200032 上海市實驗動物質量監督檢驗站,上海,200032;上海實驗動物研究中心,上海市計劃生育科學研究所,上海,200032
期 刊：	中國實驗動物學報   ISTIC
Journal：	ACTA LABORATORIUM ANIMALIS SCIENTIA SINICA
年，卷(期)：	2007, 15(6)
分類號：	R373-33
關鍵詞：	仙臺病毒    F基因    克隆    誘導表達
機標分類號：	R5 S43
機標關鍵詞：	病毒抗體    基因    克隆    原核表達載體    Sendai Virus    大腸埃希菌    抗原片段    相對分子質量    蛋白    特異性引物    特異性反應    誘導表達    陽性血清    序列設計    鑒定    檢測方法    系統表    免疫學    裂解物    抗原性
基金項目：	上海市科技發展基金