重組逆轉錄病毒介導的轉蚓激酶基因兔

Lumbrukinase Transgene Rabbit Mediated by Recombinant Retrovirus

doi：

摘要：

目的 通過重組逆轉錄病毒介導獲得轉蚓激酶基因家兔.方法 將含有蚓激酶基因的表達盒插入到逆轉錄病毒載體pLNCL中獲得了蚓激酶重組逆轉錄病毒載體,利用脂質體轉染PA317包裝細胞,G418進行篩選得到了陽性細胞克隆,克隆擴大培養后病毒上清直接注射雄性兔的睪丸組織轉染精原干細胞.結果 病毒上清經NIH3T3細胞進行滴度測定,最高滴度為1×104CFU/mL.病毒注射3月齡兔睪丸組織,過1.5個月取其睪丸、腎、脾、肝、肺進行組織切片觀察,結果正常.提取交配所得F0、F1代仔兔基因組,經PCR、Southern檢測,轉基因陽性率F0代為6.3%(2/32)、F1代為15.3%(2/13).結論 通過重組逆轉錄病毒直接注射3月齡兔睪丸組織可獲得轉基因兔,病毒對兔的臟器無損害.

作者：	劉殿峰[1]張嘉保[1]張守峰[2]任文陟[1]姚偉[1]張銳[3]扈榮良[2]
Author：	LIU Dian-feng[1]  ZHANG Jia-bao[1]  ZHANG Shou-feng[2]  REN Wen-zhi[1]  YAO Wei[1]  ZHANG Rui[3]  HU Rong-liang[2]
作者單位：	吉林大學實驗動物中心,吉林,長春,130062 軍事醫學科學院軍事獸醫研究所,長春,130062 長春市標準化信息編碼研究所,吉林,長春,130011
期 刊：	中國實驗動物學報   ISTIC
Journal：	ACTA LABORATORIUM ANIMALIS SCIENTIA SINICA
年，卷(期)：	2007, 15(6)
分類號：	S814.8
關鍵詞：	蚓激酶    重組逆轉錄病毒    包裝    轉染    轉基因
機標分類號：	R73 S81
機標關鍵詞：	重組    逆轉錄病毒載體    酶基因    睪丸組織    蚓激酶    直接注射    精原干細胞    轉基因    脂質體轉染    基因陽性率    細胞克隆    切片觀察    滴度測定    包裝細胞    無損害    上清經    培養后    基因組    表達盒    仔兔
基金項目：	國家高技術研究發展計劃(863計劃)