小鼠酪氨酸羥化酶啟動子序列分析

Sequence Analysis of Tyrosine Hydroxylase Promoter in Mice

doi：

摘要：

目的 對小鼠酪氨酸羥化酶 (tyrosine hydroxylase,TH) 啟動子進行序列分析,研究啟動子不同區域對下游基因表達調控能力.方法 高保真PCR分別擴增出450、1500、2000、2400、3400 bp TH啟動子片段置換pcDNA3中CMV啟動子,并在多克隆位點插入EGFP報告基因,重組后質粒分別瞬時轉染MN-9D細胞 (TH+) 和ECV細胞 (TH-),流式細胞儀觀察EGFP基因在細胞內表達情況.結果 轉染后MN-9D細胞中EGFP陽性率分別為8.01%、7.97%、7.85%、7.72%、7.74%,差異無顯著性.轉染ECV細胞 (TH-)中,EGFP陽性率分別為6.51%、6.35%、6.71%、0.89%、1.02%.3400bp、2400 bp啟動子片段在TH-細胞中調控能力受到明顯抑制.結論 上述啟動子片段均有調控基因表達能力,初步證明TH啟動子中特異性調控區域在2400～2000 bp范圍內.

作者：	朱孝榮[1]朱園園[2]高秀先[2]袁紅花[2]孫懷昌[3]高殿帥[2]
Author：	ZHU Xiao-rong[1]  ZHU Yuan-yuan[2]  GAO Xiu-xian[2]  YUAN Hong-hua[2]  SUN Huai-chang[3]  GAO Dian-shuai[2]
作者單位：	徐州醫學院,江蘇徐州,221002;揚州大學獸醫學院,江蘇揚州,215009 徐州醫學院,江蘇徐州,221002 揚州大學獸醫學院,江蘇揚州,215009
期 刊：	中國實驗動物學報   ISTIC
Journal：	ACTA LABORATORIUM ANIMALIS SCIENTIA SINICA
年，卷(期)：	2009, 17(1)
分類號：	Q78
關鍵詞：	小鼠    酪氨酸羥化酶啟動子    調控    表達
機標分類號：	R96 R74
機標關鍵詞：	小鼠    酪氨酸羥化酶    CMV啟動子    序列分析    Mice    Tyrosine Hydroxylase    流式細胞儀    調控能力    EGFP基因    瞬時轉染    陽性率    下游基因表達    片段    區域    調控基因    表達能力    報告基因    胞內表達    顯著性    特異性
基金項目：	國家自然科學基金，江蘇省高校自然科學基礎研究面上項目