狂犬病病毒糖蛋白在大腸埃希菌中的表達及鑒定

Expression and Identification of Rabies Virus Glycoprotein in Escherichia coli

doi：

摘要：

目的 表達狂犬病病毒糖蛋白(GP),用于狂犬病疫苗免疫抗體評估和狂犬病病毒糖蛋白功能的研究. 方法 采用分析軟件,分析其可能的抗原表位,利用PCR方法 擴增狂犬病病毒SRV9疫苗株G蛋白抗原位點區域基因,PCR產物經EcoRI和SalI雙酶切后,插入大腸埃希菌表達載體pGEX-6P-1,構建重組表達質粒pGEX-6P-1/G87a和pGEX-6P-1/G100a.將重組質粒轉化大腸埃希菌BL21感受態細胞中,在IPTG誘導下表達目的 蛋白,進行SDS-PAGE分析.表達蛋白進行電洗脫純化和Western blot鑒定分析.結果 成功構建了pGEX-6P-1/G87a和pGEX-6P-1/G100a表達質粒,序列分析表明,插入片段大小分別為1314 bp和1275 bp.SDS-PAGE分析結果 證明,在大腸埃希菌系統中成功表達了狂犬病病毒部分糖蛋白,表達的融合蛋白含有GST標簽,大小分別約為74×103和73×103.Western blot鑒定結果 表明,表達產物有抗原特異性并能與狂犬病病毒抗血清反應.結論 利用大腸埃希菌表達系統成功表達了狂犬病病毒部分糖蛋白,表達產物有良好的反應原性.

作者：	張向利[1]趙鐵柱[2]喬明明[2]楊璐[2]孫明[2]王傳彬[3]田克恭[3]陳西釗[4]
Author：	ZHANG Xiang-li[1]  ZHAO Ti-zhu[2]  QIAO Ming-ming[2]  YANG Lu[2]  SUN Ming[2]  WANG Chuan-bin[3]  TIAN Ke-gong[3]  CHEN Xi-zhao[4]
作者單位：	中國農業大學動物醫學院,北京,100094;北京世紀元亨動物防疫技術有限公司,北京,100085 北京世紀元亨動物防疫技術有限公司,北京,100085 中國動物疫病預防控制中心,北京,100094 北京世紀元亨動物防疫技術有限公司,北京,100085;中國動物疫病預防控制中心,北京,100094
期 刊：	中國實驗動物學報   ISTIC
Journal：	ACTA LABORATORIUM ANIMALIS SCIENTIA SINICA
年，卷(期)：	2009, 17(2)
分類號：	S855.3
關鍵詞：	狂犬病病毒    糖蛋白    表達
機標分類號：	R37 S85
機標關鍵詞：	狂犬病病毒    病毒糖蛋白    大腸埃希菌    重組表達質粒    鑒定結果    Escherichia coli    pGEX-6P-1    SDS-PAGE分析    表達產物    狂犬病疫苗免疫    Western    抗原特異性    感受態細胞    質粒轉化    血清反應    系統    融合蛋白    抗原位點    抗原表位    抗體評估
基金項目：