VEGFR-3基因轉染淋巴管內皮祖細胞后可溶性VEGFR-3蛋白的分泌

VEGFR-3 Gene Transfection for Its Soluble VEGFR-3 Release in Lymphatic Endothelial Progenitor Cells

doi：

摘要：

目的 研究攜帶BABL/c小鼠VEGFR-3(1-3Ig)基因的重組腺病毒轉染淋巴管內皮祖細胞(LEPCs)后,對可溶性VEGFR-3蛋白分泌及其生物學特性的作用.方法 采用巢式RT-PCR技術從BABL/c小鼠胎盤組織中擴增VEGFR-3(1-3Ig)的編碼基因,并通過重組PCR技術在基因的N端加上人CD33的信號肽.將該基因片段亞克隆入腺病毒表達載體(pDC316-IRES-EGFP),重組質粒經酶切及測序驗證后,與包裝質粒共轉染293細胞以產生重組腺病毒.將構建好的攜帶有小鼠VEGFR-3(1-3Ig)基因的重組腺病毒轉染淋巴管內皮祖細胞,通過ELISA檢測轉染細胞上清液中可溶性VEGFR-3蛋白的分泌及其對VEGF-C的中和作用.結果 成功構建了帶有信號肽的BABL/c小鼠VEGFR-3(1-3Ig)基因的腺病毒表達質粒,并獲得高滴度的攜帶有小鼠VEGFR-3(1-3Ig)基因的重組腺病毒,重組腺病毒轉染淋巴管內皮祖細胞后,可使轉染細胞分泌可溶性VEGFR-3蛋白,該蛋白具有中和VEGF-C的作用.結論 成功地制備了攜帶BABL/c小鼠VEGFR-3(1-3Ig)基因的重組腺病毒,用該病毒轉染淋巴管內皮祖細胞可使其分泌可溶性VEGFR-3,該蛋白在體外具有中和VEGF-C的作用,這為臨床抑制腫瘤淋巴管新生奠定了基礎.

作者：	敖紅譚玉珍王海杰國海東
Author：	AO Hong  TAN Yu-zhen  WANG Hai-jie  GUO Hai-dong
作者單位：	復旦大學上海醫學院人體解剖與組織胚胎學系,上海,200032
期 刊：	中國實驗動物學報   ISTIC
Journal：	ACTA LABORATORIUM ANIMALIS SCIENTIA SINICA
年，卷(期)：	2009, 17(4)
分類號：	R332
關鍵詞：	BABL/c小鼠    VEGFR-3    腺病毒載體    轉染    淋巴管內皮祖細胞
機標分類號：	R73 R3
機標關鍵詞：	VEGFR-3蛋白    基因轉染    淋巴管內皮祖細胞    可溶性    細胞分泌    Progenitor Cells    重組腺病毒    BABL/c小鼠    VEGF-C    轉染細胞    腺病毒表達載體    RT-PCR技術    中和作用    重組質粒    信號肽    生物學特性    淋巴管新生    ELISA檢測    抑制腫瘤    胎盤組織
基金項目：	國家自然科學基金，高等學校博士學科點專項科研基金