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錐蟲早老素蛋白親水區的克隆和表達純化

Cloning and Expression of Hydrophilic Regions of Presenilin in Trypanosome

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doi:
摘要:
目的 體外表達錐蟲早老素蛋白親水區肽段,以制備抗血清用于功能研究.方法 根據錐蟲早老素蛋白二級結構特性,設計引物分別擴增N端及C端片段的親水區肽段基因,裝入原核表達載體進行表達,并通過變性純化方法獲得足夠量表達蛋白,制備兔抗血清.結果 成功擴增并克隆錐蟲早老素蛋白親水區片段L2及L7,并分別采用變性磁珠法和變性樹脂法進行大量蛋白產物純化,濃縮純化產物制備兔抗血清經Western blot雜交驗證,出現目的 蛋白大小陽性條帶.結論 成功表達錐蟲早老素蛋推測N端及C端親水肽段,并成功制備抗血清,可用于錐蟲早老素蛋白功能分析.
作者 趙錦[1]太田伸生[2]鈴木高史[2]鈴木光子[2]藪義貞[2]大島茂[2]羽藤真理子[2]張仁利[1]
Author: ZHAO Jin[1]  OHTA N[2]  SUZUKI T[2]  SUZUKI M[2]  YABU Y[2]  OHSHIMA S[2]  HATO M[2]  ZHANG Ren-li[1]
作者單位
  1. 深圳市疾病預防控制中心,深圳,518020
  2. 日本名古屋市立大學醫學院感染生體防御學,日本名古屋
期 刊: 中國比較醫學雜志   ISTIC
Journal: CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVE MEDICINE
年,卷(期) 2008, 18(6)
分類號 R-33
關鍵詞: 早老素蛋白 知識脈絡    阿爾茨海默病 知識脈絡    布氏錐蟲 知識脈絡    蛋白表達 知識脈絡   
機標分類號 R59 S85
機標關鍵詞 錐蟲    早老素蛋白    克隆    兔抗血清    原核表達載體    肽段    變性    陽性條帶    體外表達    濃縮純化    擴增    結構特性    功能研究    功能分析    純化方法    產物純化    表達蛋白    物制備    樹脂法    磁珠法
基金項目 廣東省深圳市科技計劃
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