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弓形蟲(Toxoplasma gondii)的PCR檢測方法在籠養獼猴群中的應用
Application of PCR Assay for Detection of Toxoplasma gondii in Breeding Rhesus Macaques
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- 目的 建立快速、靈敏、特異及檢測結果易判斷的PCR方法,并應用于大規模獼猴種群的弓形蟲常規檢測中.同時比較巢式PCR和單一PCR的一致性.方法 根據弓形蟲保守基因p30(SAGI)設計了內、外兩對進行巢式PCR擴增以及B1基因設計一對引物進行單一PCR擴增,將DNA樣本進行10倍倍比稀釋,以檢測巢式PCR反應的靈敏度;并對醫學生物學研究所自繁獼猴共150只進行了弓形蟲檢測.結果 巢式PCR檢測法檢測限度可達10-3>ng/uL,而且方法特異.兩種PCR法檢測結果基本一致,其中巢式PCR檢測陽性率(10%)稍高于單一PCR檢測陽性率(8.67%).結論 巢式PCR和一次PCR方法都可應用于獼猴弓形蟲的常規檢測中,并提示巢式PCR比單一PCR更敏感、檢出率更高.
參考文獻和引證文獻