結核分支桿菌ESAT-6基因蛋白的表達

Fusion Expression of the ESAT-6 Gene of the Tuberculosis Bacterium

doi：

摘要：

目的 構建致病性結核分枝桿菌早期分泌性抗原靶(Early secretary antigenic target, ESAT-6)基因的pET原核表達載體,誘導表達并初步鑒定該蛋白.方法 設計特異性引物,用PCR方法從結核分枝桿菌標準株H37Rv基因組中擴增ESAT-6基因,產物通過雙酶切克隆入pET-32a(+)質粒,經PCR、酶切、測序等方法鑒定后,轉入大腸桿菌BL21菌體中IPTG誘導表達,并經鎳柱純化、Western-blotting鑒定.結果 所獲得ESAT-6基因序列與GenBank公布的完全一致;表達融合蛋白相對分子質量約2.5×104,并能與特異性單抗結合,具有一定免疫學活性.結論成功表達純化并鑒定構建了ESAT-6融合蛋白.

作者：	王敏[1]羅琴芳[2]黃韌[2]
Author：	WANG Min[1]  LUO Qin-fang[2]  HUANG Ren[2]
作者單位：	廣東醫學院,湛江524023;廣東省實驗動物監測所,廣州510260 廣東省實驗動物監測所,廣州,510260
期 刊：	中國比較醫學雜志   ISTIC
Journal：	CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVE MEDICINE
年，卷(期)：	2008, 18(7)
分類號：	R378
關鍵詞：	結核分枝桿菌    早期分泌性抗原靶ESAT-6    載體構建    融合表達
機標分類號：	R37 R39
機標關鍵詞：	結核分支桿菌    結核分枝桿菌    早期分泌性抗原靶    誘導表達    融合蛋白    鑒定    基因序列    原核表達載體    相對分子質量    方法    特異性引物    特異性單抗    雙酶切    構建    大腸桿菌    表達純化    柱純化    致病性    免疫學    基因組
基金項目：	廣東省科技廳科技計劃，廣東省自然科學基金