兔支氣管敗血波氏桿菌PCR檢測方法的建立及應用

Development and Application of PCR Assay for Detection of Bordetella bronchiseptica in Rabbits

doi：

摘要：

目的 建立一種簡便、快速、敏感、特異的適用于支氣管敗血波氏桿菌的PCR檢測方法.方法 根據兔支氣管敗血波氏桿菌(Bordetella bronchiseptica)的fim2基因序列設計了一對特異性引物,進行PCR擴增、特異性和敏感性試驗,并將其應用于臨床樣品的檢測.結果 利用該PCR方法擴增出425bp的目的 基因片段,該產物序列與GeneBank上公布的基因序列同源性為100%.特異性試驗表明,該方法對大腸埃希氏菌、多殺性巴氏桿菌、魏氏梭菌和金黃色葡萄球菌均無交叉性反應;并且最小可檢出菌液濃度為3.6CPU.用該PCR方法檢測了從江蘇、山東等地采集的146份兔鼻拭子,結果檢出支氣管敗血波氏桿菌陽性92例,陽性率為63.01%.結論建立了快速檢測支氣管敗血波氏桿菌的PCR方法.

作者：	王欣[1]惲時鋒[1]王芳[2]范志宇[2]
Author：	WANG Xin[1]  YUN Shi-feng[1]  WANG Fang[2]  FAN Zhi-yu[2]
作者單位：	南京軍區南京總醫院比較醫學科,南京,210002 江蘇省農業科學院,南京,210014
期 刊：	中國比較醫學雜志   ISTIC
Journal：	CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVE MEDICINE
年，卷(期)：	2008, 18(7)
分類號：	S852.61
關鍵詞：	兔    支氣管敗血波氏桿菌    PCR
機標分類號：	S85 R37
機標關鍵詞：	兔支氣管敗血波氏桿菌    檢測方法    特異性引物    金黃色葡萄球菌    多殺性巴氏桿菌    基因片段    大腸埃希氏菌    序列同源性    特異性試驗    敏感性試驗    陽性率    序列設計    魏氏梭菌    臨床樣品    擴增    快速檢測    菌液濃度    交叉性    應用    山東
基金項目：	中國人民解放軍南京軍區南京總醫院科研基金