小鼠酪氨酸酶siRNA的體外有效性實驗研究

An Efficient siRNA Designed to Suppress Tyrosinase of Mice in Vitro

doi：

摘要：

目的 通過RNAi技術,篩選出針對小鼠酪氨酸酶的有效siRNA,為酪氨酸酶異常等人類疾病的動物模型制作及該類疾病的預防和治療奠定基礎.方法 利用針對小鼠酪氨酸酶mRNA的不同干擾片段分別轉染小鼠黑色素瘤B16細胞系,同時采用陰性干擾片段轉染作為陰性對照,單純脂質體轉染作為空白對照.使用實時熒光定量PCR、酪氨酸酶活性測定和黑色素含量測定3種方法分3個時間點于轉染后24、48、72 h對不同組的細胞干擾結果進行檢測.結果 siNM_011661_001、siNM_011661_002、siNM_011661_003三個干擾片段均能在轉染后發揮一定的干擾作用,其中siNM_011661_001在轉染后發揮的干擾效果最強,在降低酪氨酸酶基因mRNA表達、酶活性、以及黑素含量三方面分別能起到82.81%、64.73%、52.53%的抑制作用.結論 針對小鼠酪氨酸酶的siNM_011661.001序列能在轉錄后水平發揮高效、穩定的基因沉默作用,是發揮RNAi的優勢序列.

作者：	賈秀華[1]黃冰[1]莊菁[1]朱翔[2]廖東江[1]葛堅[1]林少春[1]徐曉平[1]彭展[1]
Author：	JIA Xiu-hua[1]  HUANG Bing[1]  ZHUANG Jing[1]  ZHU Xing[2]  LIAO Dong-jiang[1]  GE Jian[1]  LIN Shao-chun[1]  XU Xiao-ping[1]  PENG Zhan[1]
作者單位：	中山大學中山眼科中心眼科學國家重點實驗室,廣州,510060 中山大學附屬第三醫院,廣州,510630
期 刊：	中國比較醫學雜志   ISTIC
Journal：	CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVE MEDICINE
年，卷(期)：	2008, 18(12)
分類號：	R-33
關鍵詞：	RNAi    酪氨酸酶    B16細胞
機標分類號：	R73 S82
機標關鍵詞：	小鼠黑色素瘤    酪氨酸酶基因    有效性    實驗研究    脂質體轉染    干擾片段    抑制作用    實時熒光定量    酶活性測定    預防和治療    優勢序列    陰性對照    細胞系    模型制作    空白對照    疾病    基因沉默    黑素含量    含量測定    干擾作用
基金項目：	國家自然科學基金，廣東省科學事業/科研條件計劃