七種常見寵物二級抗體的制備和HRP標記

Preparation and HRP Labeling of Rabbit Polyclonal Antibodies against Seven Pet Animals

doi：

摘要：

目的 制備兔抗7種中國家庭中常見寵物的二級抗體,并進行辣根過氧化酶標記,為寵物血清學檢測系統的建立提供工具.方法 利用飽和硫酸銨沉淀法粗純抗體后,再利用protein A 或protein G 親和層析的方法進一步純化寵物的IgG,免疫大耳白兔制備抗血清,利用免疫雙擴散來檢測抗血清的效價,并用Protein A親和層析的方法來純化兔抗寵物的二級抗體,采用簡易過碘酸鈉法對純化的兔抗寵物的二級抗體進行HRP標記,通過ELISA方法測定標記抗體的效價,并利用Western blotting考察標記抗體的特異性.結果 純化了狗、家貓、豚鼠、金倉鼠、松鼠、花鼠和龍貓7種寵物的血清IgG,免疫雙擴散法測定兔抗這7種寵物的抗血清效價均達到1∶32,并對純化的兔抗7種寵物的二級抗體進行了HRP標記,ELISA測定標記抗體的效價達到1∶(2000～15000)左右,Western blots顯示標記抗體具有很好的特異性.結論 成功制備了HRP標記的兔抗7種中國家庭中常見寵物的二級抗體,為寵物血清學檢測體系的建立提供了工具.

作者：	林樹柱劉先菊楊帆秦川張連峰
Author：	LIN Shu-zhu  LIU Xian-ju  YANG Fan  QIN Chuan  ZHANG Lian-feng
作者單位：	中國醫學科學院實驗動物研究所北京協和醫學院比較醫學中心,衛生部人類疾病比較醫學重點實驗室,北京,100021
期 刊：	中國比較醫學雜志   ISTIC
Journal：	CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVE MEDICINE
年，卷(期)：	2009, 19(6)
分類號：	R392
關鍵詞：	寵物    IgG    兔    辣根過氧化酶
機標分類號：	R73 R55
機標關鍵詞：	寵物    標記抗體    制備    HRP標記    Pet    Polyclonal Antibodies    Labeling    抗血清效價    免疫雙擴散法    純化    中國家庭    親和層析    ELISA方法    Western    血清學    特異性    檢測系統    ELISA測定    過碘酸鈉法    飽和硫酸銨
基金項目：	社會公益研究專項目