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Dkk3系統性表達轉基因小鼠的建立
Establisment of Systemic Expression Dkk3 Transgenic Mice
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- 目的 建立系統性表達Dkk3轉基因模型小鼠,為研究Dkk3生理功能及對骨生長發育的作用提供工具動物.方法 通過ISH來觀察Dkk3 于C57BL/6J小鼠全身組織中的表達.把Dkk3基因插入系統性表達CMV啟動子下游,構建轉基因表達載體,顯微注射法建立C57BL/6J Dkk3轉基因小鼠.PCR鑒定轉基因小鼠的基因型,RT-PCR檢測Dkk3在骨髓中的表達,Western Blot檢測Dkk3在肺臟、腦及肝臟中的表達,BrdU標記染色觀察轉基因小鼠骨生長情況.結果 在生理狀態下, Dkk3基因廣泛表達,在骨、心臟及腦等組織高表達.建立的2個轉基因小鼠品系中,轉入的Dkk3基因在骨髓、腦、肝臟及肺組織中均有明顯表達.BrdU整合率實驗顯示轉基因小鼠長骨骺區細胞增殖明顯低于同齡對照小鼠.結論 建立了系統性表達Dkk3轉基因小鼠,轉入的Dkk3基因明顯抑制小鼠長骨骨骺區細胞增殖,為Dkk3對骨生長發育的作用研究提供了有價值的工具動物.
參考文獻和引證文獻