人β细胞素基因原核表达载体的构建

Construction of human BTC prokaryotic expression vector

目的 构建人BTC基因的原核表达载体.方法 以人胰岛细胞瘤cDNA为模板,采用聚合酶链式反应(PCR)扩增BTC基因成熟蛋白编码区的全部序列,克隆入原核细胞表达载体PET32a(+)中,经限制性内切酶双酶切及DNA序列分析鉴定目的基因.结果 PCR扩增的特异性片段长度为240 bp,以此构建的重组质粒PET32a(+)-BTC,经KpnⅠ和XhoⅠ双酶切后显示5.9 kb和250 bp左右的两条片段,测序结果与Genbank中的人BTC基因cDNA(Genbank序列号NM_001729)序列一致.证明人BTC基因已成功克隆到了原核细胞表达载体PET32a(+)中.结论 成功构建了PET32a(+)-BTC重组原核表达载体.

作 者：

陈寒蓓 董艳 苏青 CHEN Han-bei DONG Yan SU Qing  

作者单位：

上海交通大学附属新华医院,内分泌科,上海,200092 

刊 名：

中国现代医学杂志  ISTIC PKU

英文刊名：

CHINA JOURNAL OF MODERN MEDICINE 

年，卷(期)：

2007 17(2) 

分类号：

R3 

关键词：

BTC   基因克隆   原核表达载体  

机标分类号：

R51 R36 

机标关键词：

β细胞素基因表达载体的构建原核细胞表达载体重组原核表达载体聚合酶链式反应限制性内切酶双酶切胰岛细胞瘤特异性片段蛋白编码区重组质粒序列分析扩增克隆序列号证明显示模板鉴定 

基金项目：

 

DOI：